一、原理

1.1 物質對光的選擇性吸收
當光束照射到物質上時，光與物質發生相互作用，產生反射、散射、吸收或透射。
若被照射的是均勻溶液，光的散射可以忽略。
1.1.1 溶液顏色的產生
當一束白光通過某一有色溶液時，一些波長的光被溶液吸收，另一些波長的光則透過溶液。
透射光或反射光刺激人眼使人感到顏色的存在。
人把自身能感覺到的光定義為可見光。
在可見光區，不同波長的光呈現不同的顏色，因此溶液的顏色由透射光的波長所決定。
透射光與吸收光可組成白光，故稱這兩種光互為補色光，兩種顏色互為補色。

1.1.2 光吸收的本質
當一束光照射到某物質或其溶液時，組成該物質的分子、原子或離子與光子發生“碰撞”，光子的能量就轉移到分子、原子或離子上，是這些粒子由最低能態（基態）躍遷到較高能太（激發態），這個作用稱為物質對光的吸收。
被激發的粒子約在10-8s后回到基態，并以熱或熒光等形式釋放出能量。
分子、原子或離子具有不連續的量子化能級，僅當照射光光子的能量hυ，與被照射物質粒子的基態和激發態能量之差相當時，才能發生吸收。
不同物質微粒由于結構不同而具有不同的量子化能級，其基態和激發態能量差也不相同。
所以物質對光的吸收具有選擇性。

1.1.3 吸收曲線
吸收曲線，也稱為吸收光譜，描述了物質對不同波長的光的吸收能力。
將不同波長的光透過某一固定濃度和厚度的有色溶液，測量每一波長下有色溶液對光的吸收程度（即吸光度），然后以波長為橫坐標，以吸光度為縱坐標作圖，繪制的曲線即為吸收曲線。
不同濃度的同一物質，在吸收峰附近的吸光度隨著濃度增加而增大，但最大吸收波長不變。
若在最大吸收波長處測定吸光度，則靈敏度最高。
因此，吸收曲線是分光光度法中選擇測定波長的重要依據。