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1、不可與大環內脂類抗生素如紅霉素、麥迪霉素、螺旋霉素等合用以免降低藥效。
2、不可與堿性藥物合用。如在含青霉素的溶液中加入氨茶堿、碳酸氫鈉或磺胺嘧啶鈉等，會使混合液的pH值大于8，青霉素可因此失去活性。
3、青霉素在偏酸性的葡萄糖輸液中不穩定，長時間靜滴過程中會發生分解，不僅療效下降，而且更易引起過敏反應。因此青霉素應盡量用生理鹽水配制滴注，且滴注時間不可過長。
4、青霉素在干燥狀態下較穩定，一旦溶解即不斷分解。因此要“現配現用”，不宜溶解后存放，以保證藥效，減少致敏物質的產生。
5、每日一次靜滴給藥方法并不可取。因為當停止滴入后，畜禽體內藥物迅速消除，待第二天給藥，因間隔時間過長，細菌又大量繁殖。
6、在搶救感染性休克時，不宜與阿拉明或新福林混合靜滴。以免使兩者效用均降低。
7、不可與維生素C混合靜滴。因為維生素C具有較強的還原性，可使青霉素分解破壞，降效或失效。
8、不可與含醇的藥物合用，如氫化可的松、氯霉素等均以乙醇為溶媒，而乙醇能使青霉素降效。
9、青霉素與酚妥拉明、去甲腎上腺素、阿托品、撲爾敏、輔酶A、細胞色素C、維生素B6、催產素、利血平、苯妥英鈉、氯丙臻、異丙臻等藥混合后，可發生沉淀、混濁或變色，應禁忌混合靜滴。
