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免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):IgE的分離與提純

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

(一)材料與試劑

1.血清

2.飽和硫酸銨溶液

3.洗脫液0.005Mol/L pH7.4PB液

0.025 Mol/L pH7.4PB液

0.01Mol/L pH7.4PBS液(0.14mol/L NaCl)

4.DE52

5.SephadexG150

(二)操作方法

1.取血清倍比稀釋后,加等量飽和(NH4)2SO4溶液,鹽析。

2.離心取沉淀,溶于少量生理鹽水中,透析、除鹽。

3.過DE52柱,以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脫,收集洗脫蛋白峰(IgG),棄去。

4.換以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脫,洗下的蛋白峰主要是IgE。

5.透析除鹽。

6.過G150柱,以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脫,收集洗脫液即為純化的IgE。

7. 濃縮、鑒定。

 
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