中文字幕欧美一区二区_久久精品国产亚洲77777_91在线?清?看_狠狠干妹子_人妻夜夜爽爽88888视频_97综合网

VIP標識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng)服務號
 

交互扣除RNA差別顯示技術(RSDD)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
交互扣除RNA差別顯示技術(RSDD)是由Kang等于1998年最新提出的結合扣除雜交和RNA差別顯示兩項技術發(fā)展而出的一種有效、快速分離差別表達基因序列的方法。該方法應用于腫瘤進展的研究,可鑒定和克隆已知的和高比率(>65%)的未知序列,這包括分別作為增強和抑制表達進展功能的cDNAs,分別稱為增強進展基因(PEGen)和抑制進展基因(PSGen)。1999年通過交互扣除RNA差別顯示技術已鑒定出了16條差別表達的基因,其中有5條為未知的PEGen,6條為未知的PSGen。該方法主要由三部分組成:
交互扣除(reciprocal subtraction):首先是要獲得兩個具有差別基因表達的細胞系的cDNA文庫,然后將這兩個文庫進行交互扣除雜交,從而獲得兩個扣除cDNA文庫。隨后通過體內(nèi)剪切得到質粒cDNA文庫;
差異顯示(differentialdisplay):由交互扣除cDNA文庫獲得的純化質粒可直接進行差異顯示,這包括PCR擴增(加入3種3′錨定引物和18種5′隨機引物)和進行5%序列膠電泳并切割回收差異顯示條帶;
表達分析(expression analysis):運用反向Northern印跡分析(reverse Northern blotting)和Northern Blot分析鑒定經(jīng)再擴增的DNA片段的差異表達。反向Northern Blotting是將經(jīng)差異顯示得到的擴增后的DNA片段轉膜,并分別與來自兩個不同細胞系總RNA經(jīng)反轉錄制備的32P標記的cDNA第一鏈探針(reverse transcribed 32P-cDNA prob)進行雜交。234條再次擴增的DNA片段中有181條被探測到(77%),其差異表達顯示水平比兩種細胞間Northern blot分析要高1.8倍。最后經(jīng)Northern blotting分析得到兩種細胞系差別表達的DNA片段被克隆到載體上進行測序分析。RSDD目前被證實對于有效且快速鑒定發(fā)生在復雜基因組以及細胞生理變化中差異表達的基因是很有價值的。
 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.154 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 精品少妇的一区二区三区四区 | 国产成人精品一区一区一区 | 久久爱综合网 | 韩国激情高潮无遮挡hd | 91夜夜蜜桃臀一区二区三区 | 午夜精品一区二区三区福利视频 | 无套内射chinesehd熟女 | 国产综合高清在线观看 | 伊人逼逼| 日本中文字幕日韩精品免费 | 久久久久久国产精品免费播放 | 最新视频-x88av | 国产真实乱子伦视频播放 | 麻豆资源在线 | 篱笆女人狗电视连续剧第一部 | 久久另类 | 女女女女bbbb毛片免费视频 | 久久久精品视 | 强壮的公次次弄得我高潮a片日本 | 成人免费在线视频播放 | 正在播放国产对白孕妇作爱 | 欧美ⅴa| 91看片在线播放 | 成人片在线看 | 日韩黄色大片在线观看 | 狠狠色丁香婷婷综合久久来来去 | 国产精品人妻久久久久 | 超碰在线人人爱 | 狼群社区视频WWW国语 | 日本草逼 | 中文字幕永久2021 | 好紧好湿好爽免费视频在线观看 | A片无码国产精品性BBV | 成人免费在线视频播放 | 欧美老妇视频热 | 国产成人一区二区在线观看 | 伊人久久精品欧洲综合网 | 久久综合九色综合97伊人 | 丰满老熟女毛片hd | 欧美国产视频 | 一级片视频免费观看 |