8. 線性
樣本經(jīng)梯度稀釋后檢測分析即為線性分析，此過程也是用于消除樣本的基質(zhì)效應。基質(zhì)效應導致的結果有假陰性和假陽性兩種，在線性稀釋時就可以辨別出來，當存在基質(zhì)效應時樣本的稀釋線性就不會滿足，說明該類樣本有可能不適用ELISA kit，在研發(fā)階段就需要優(yōu)化反應體系等消除基質(zhì)效應帶來的干擾。
9. 回收率
回收實驗可檢測試劑盒是否受干擾因子的影響，也是辨別基質(zhì)效應的一種方法。在研發(fā)過程中，一般會采用低、中和高濃度的分析物被摻入到已知濃度的驗證樣本中，進行回收實驗測定，回收率應介于80%-120%，表明試劑盒的性能較好。
10. 穩(wěn)定性
即試劑盒在有效期內(nèi)的穩(wěn)定性。通常采用加速降解的方法來推斷試劑盒的有效期。通常試劑盒在37℃放置一天折合有效期2個月，實際工作中，一般將試劑盒在37℃破壞3-7天后，然后檢測上述指標，觀察是否在范圍內(nèi)。也可留樣至有效期后進行檢驗，來衡量有效期，對于批量大的指標，可將加速降解和留樣檢驗相結合的方法。
另外，ELISA實驗操作時質(zhì)控標準如下：
1、嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
2、加樣后及時放人孵箱。標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗徹di。
3、封板溫育時，各孔一定要封嚴，防止陽性標本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板”的出現(xiàn)。
4、用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后好在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板”的出現(xiàn)。
5、合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。
6、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
7、顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
8、加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
9、應保證C清潔，整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結果。